促黃體生成素檢測，又名排卵檢測試劑，英文簡稱：（LH），用於預測排卵時間，幫助女性把握受孕時機，或者用於實施安全期避孕。
基本介紹
- 中文名：促黃體生成素檢測
- 英文簡稱：LH
使用情況,檢測意義,檢測方法,酶聯免疫技術,免疫酶聯法,膠體金技術,檢測原理,
使用情況
促黃體生成素檢測，又名排卵檢測試劑，英文簡稱：（LH），用於預測排卵時間，幫助女性把握受孕時機，或者用於實施安全期避孕。
檢測意義
人類促黃體激素（LH）是腦垂體前葉所分泌的一種糖蛋白激素，存在於人的血液和尿液中，其作用是刺激卵巢內成熟卵子的釋放。LH在月經中期急劇分泌，形成LH峰，由基礎水平期的5～20mIU/ml迅速上升至高峰期的25～200mIU/ml。尿液中的LH濃度通常在排卵前36～48小時左右突然大幅度上升，在14～28小時達到高峰，高峰後約14-28小時卵泡膜破裂，排出成熟卵子。LH在排卵後兩天內恢復至基礎水平，進入黃體期，黃體期通常持續14天。隨後，新的卵泡又開始發育，進入下一個月經周期，如此周而復始，直到妊娠。女性在LH高峰後的1～3天內最容易受孕，因而，檢測LH在尿液中的存在水平能夠用於預測排卵時間。
檢測方法
酶聯免疫技術
套用單克隆與多克隆抗體相結合的酶聯免疫測定法，檢測生育期婦女尿液促黃體生成素的分泌峰值期，用以預測排卵時間。是一種新型的檢測排卵方法/
免疫酶聯法
觀察其線性範圍、試劑顯色穩定性、精密度、準確度以及放免配對比較等。該方法具有重複性好，特異性高，準確可靠，與RIA具有良好的相關性，且無放射性污染，值得推薦。用磁性微粒分離酶標免疫技術是一種非同位素標記免疫檢測的先進技術，稱為磁性免疫技術(MAIA)。磁性微粒分離酶標免疫技術將免疫磁性微珠分離技術引入酶聯免疫測定法中，用非同位素標記的鹼性磷酸酶（ALP）和異硫氰酸螢光素（FITC）標記單克隆抗體，與抗原（LH）反應形成酶標記抗體-抗原-FITC標記抗體的複合物與磁性微粒結合，在永久磁體吸引下使其沉澱至管底，分離出遊離酶標抗體，加入底物磷酸酚酞（PMP），ALP催化PMP水解釋放出酚酞，在PH10.5的緩衝液中粉紅色，再以永久磁體吸引磁性複合物使其沉澱，上清液置Seroeyme型酶標免疫分析儀測定。由於抗原抗體反應在液相中進行，不僅反應速度快，而且均勻，整個檢測過程僅需1-2小時，時間明顯短於固相分離。本方法表明以鹼性磷酸酶為標記物，磷酸酚酞作為基質，酚酞呈色穩定，重複性較好。將兩份不同濃度的臨床血清標本作連續測定，觀察其精密度：批內差異（n=10）,LH平均為1.94%，；批間差異（n=5）,LH平均為8.0%。同時，分別將不同濃度的加到標本中，作回收試驗檢測其精確性，結果: LH平均回收率為104.5%，表明該方法具有較高的精密度和精確度，能滿足臨床檢測需要。將同一份標本分別用 和 同時檢測，結果LH相關係數為0.855，P〈0.001，表明兩者呈良好的直線相關。所以認為磁性微粒分離酶標免疫技術是一項值得推薦的微量物質檢測法。
膠體金技術
以雙抗體夾心法原理來定性檢測女性尿液中的LH存在水平，目前人們大多可以自行在藥店購買到促黃體生成素檢測試紙，比如上海凱創生物生產的促黃體生成素檢測試劑，就是能夠在家庭進行自我檢測，從而達到幫助女性把握受孕時機，或者用於實施安全期避孕。
檢測原理
採用膠體金免疫技術，以雙抗體夾心法原理來定性檢測女性尿液中的LH存在水平。在試劑卡中纖維膜上質控線（C線）包被有羊抗鼠IgG，檢測線（T線）包被有抗LH單克隆抗體-2，另一端包被有抗LH單克隆抗體-1-膠體金複合物。檢測時，尿樣中如有LH存在，則與膠體金上抗LH單克隆抗體-1形成複合物，並在膜上運行，與檢測線上的抗LH單克隆抗體-2形成抗體-抗原-抗體膠體金複合物，產生紅色線條。而對照線上羊抗鼠IgG為多克隆抗抗體，其總是與膠體金上的抗體結合，形成一定深度的紅線，作為檢測線的對比，此強度的紅線相當於25mIU/mlLH的存在。
促黃體生成素檢測試紙